小鼠肝腎功能檢測之小鼠生理生化指標(biāo)檢測:
1. 實驗小鼠血清取材要求
采血后,立即將血液放入1.5 mL離心管(不需加抗凝劑或防腐劑)。讓血液在室溫下靜置30 - 60分鐘。在相對離心力(relative centrifugal force ,RCF)14000g下離心血樣10 - 15分鐘,用移液管吸取分離血清,并轉(zhuǎn)移到干凈的離心管中??蓪⒀鍢颖驹?4000 g下再離心2 - 3分鐘,以分離任何剩余的紅細(xì)胞。將分離好的血清轉(zhuǎn)移到干凈的離心管中。
2. 實驗小鼠血漿取材要求
血液必須在采血時或采血后立即與抗凝血劑充分混合。采血時與抗凝劑混合方法:用于血液收集的無菌1mL注射器可以將1 mL抗凝血劑從小瓶吸入注射器,然后將全部抗凝血劑重新注回小瓶,即在采血前用抗凝血劑“灌注”采血的注射器。采血后與抗凝劑混合方法:向1.5 mL離心管中加入不超過150μL的抗凝劑。在相對離心力14000g下離心血樣10 - 15分。用移液管吸取分離的血漿,并轉(zhuǎn)移到干凈的離心管中。可將血漿樣本在14000 g下再離心2 - 3分鐘,以分離任何剩余的紅細(xì)胞。將分離好的血漿轉(zhuǎn)移到干凈的離心管中。
3. 血清與血漿儲存要求
大多數(shù)生化分析最好的時間是收集后2小時內(nèi)在室溫下進行分析。如果血清或血漿樣品不能在收集后2小時內(nèi)進行處理,可將樣品(放在加蓋的試管中)放入4℃冰箱中短期儲存(1周)或放入20℃或更冷的冰箱中長期儲存(1周至6個月)。但有些指標(biāo)檢測例外,例如氨、乳酸鹽和血氣分析需要在采集后并在冰浴或4°C立即被分析。膽紅素在暴露于直射光時會降解,因此血液用于膽紅素分析應(yīng)該避光(可用鋁箔包裹離心管)。檢測乳酸脫氫酶建議室溫儲存。
4. 實驗小鼠血液/血漿臨床生化指標(biāo)正常參考值
5. 國內(nèi)利用全自動生化分析儀檢測血液樣本
全自動生化分析儀根據(jù)光電比色原理來測量血清或血漿中某種特定化學(xué)成分的儀器,可以用于大小鼠血液檢測,檢測肝腎功能、血糖、血脂、電解質(zhì)等。
檢測內(nèi)容:
A 大小鼠血常規(guī)檢測
B 五分類血球分析(帶網(wǎng)質(zhì)紅細(xì)胞)
C 血生化檢測
a 肝功能:(總蛋白(TP),白蛋白(ALB),總膽紅素(TBIL),谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT),谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST),堿性磷酸酶(ALP),膽堿酯酶(CHE),谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT),直接膽紅素(DBIL);
b 腎功能:肌酐(CRea),尿素(UREA),尿酸(UA) ,尿蛋白(UP);
c 血脂:甘油三脂(TG),膽固醇(T-CHO),低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C),高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C),游離脂肪酸(NEFA);
d 離子類:鈣(Ca),磷(P),鉀(K),鈉(Na),氯(CL),血清鐵(Fe);
e 心肌酶類:乳酸脫氫酶(LDH),肌酸激酶(CK)
f 糖尿病檢測項目:血糖GLU;
g 心血管風(fēng)險因子:同型半胱氨酸(HCY)
樣本要求:血生化送檢樣本量>100μl (本底為100μl,每個指標(biāo)需增加15μl);血常規(guī)送檢樣本量>150μl。
6. 實驗小鼠尿液收集方法及檢測指標(biāo)正常值