更新時(shí)間:2024-09-26
油紅O脂肪染色法是指在日常病理診斷和科研工作中為了顯示組織內(nèi)的脂肪常采用油紅O進(jìn)行染色的方法,油紅O為脂溶性染料,在脂肪內(nèi)能高度溶解,可特異性的使組織內(nèi)甘油三酯等中性脂肪著色。
油紅O脂肪染色法是指在日常病理診斷和科研工作中為了顯示組織內(nèi)的脂肪常采用油紅O進(jìn)行染色的方法,油紅O為脂溶性染料,在脂肪內(nèi)能高度溶解,可特異性的使組織內(nèi)甘油三酯等中性脂肪著色。
油紅O脂肪染色服務(wù)詳細(xì)介紹:
2. 改良的油紅O染色液 油紅O 0. 5g, 50%乙醇100ml。將油紅O溶于乙醇內(nèi),且不斷攪拌至*溶解即可。配制好的染液置磨口瓶內(nèi)保存?zhèn)溆谩?/p>
3. 染色步驟 ①切片干燥后入50%乙醇稍洗;②油紅O乙醇染液作用8min;③50%乙醇分化,自來水終止分化;④蘇木素復(fù)染核,自來水返藍(lán),甘油明膠封片.油紅O染色法×400
油紅0脂肪染色法是指在日常病理診斷和科研工作中為了顯示組織內(nèi)的脂肪常采用油紅0進(jìn)行染色的方法,油紅0為脂溶性染料,在脂肪內(nèi)能高度溶解,可特異性的使組織內(nèi)甘油三酯等中性脂肪著色。
正常情況下,除脂肪細(xì)胞外其他細(xì)胞內(nèi)-般不見或僅見少量脂滴。在病理狀態(tài)下如這些細(xì)胞中出現(xiàn)脂滴或脂滴明顯增多,特別是在心、肝.腎等實(shí)質(zhì)器官發(fā)生脂肪變性時(shí),胞漿內(nèi)出現(xiàn)大小不一的空泡, 這時(shí)常需鑒別空泡性質(zhì),用脂肪染色來區(qū)分是脂肪變性還是水樣變性或糖原貯留。在動脈粥樣硬化時(shí),內(nèi)皮細(xì)胞下的脂質(zhì)沉著,用脂肪染色能將脂質(zhì)清晰地顯示出來。由脂肪組織病變所弓|起的脂肪栓塞可用脂肪染色顯示栓子內(nèi)的脂質(zhì),從而確診脂肪栓塞。用于腫瘤組織的鑒別診斷,由脂肪組織所發(fā)生的腫瘤在與其他組織來源的腫瘤相區(qū)分時(shí),可以借助脂肪染色,脂肪組織所發(fā)生的腫瘤,脂肪染色為陽性。并可根據(jù)所顯示的細(xì)胞形態(tài)特點(diǎn)與類似腫瘤進(jìn)行鑒別,腎透明細(xì)胞癌與腎上腺瘤,卵巢纖維瘤與卵泡膜細(xì)胞瘤。皮脂腺瘤與鱗狀細(xì)胞癌的鑒別診斷有意義。
2.染色:入油紅0工作液孵育10-15min;細(xì)胞爬片破膜10-15min, PBS漂洗3次,5min次, 入油紅工作液37°C染色1-2h。
3.分化: 75%酒精分化2s,水洗1min。
4、復(fù)染細(xì)胞核: Harris蘇木素復(fù)染1-2min左右, 自來水洗,1%的鹽酸酒精分化數(shù)秒,自來水沖洗,氨水返藍(lán),流水沖洗。
5、封片:用紙巾吸去周邊水分,甘油明膠封片。
脂滴呈橘紅色至鮮紅色:細(xì)胞核呈深藍(lán)色。
1.油紅0是對脂類物質(zhì)進(jìn)行染色,石蠟切片在處理過程中脂類物質(zhì)無法保存,所以石蠟切片不能進(jìn)行油紅0染色。
2.油紅0染液使用一段時(shí)間后,染出的脂滴顏色會偏黃,此時(shí)就需要更換染液。
3.油紅染色時(shí),動作要輕,因?yàn)橹我滓莆?,并且在封片時(shí)應(yīng)避免蓋玻片滑動。
傳統(tǒng)配制油紅O染液 ,所用的丙酮和異丙醇極易揮發(fā),致使染液產(chǎn)生沉淀,染色時(shí)易在組織片上留下紅色的結(jié)晶,而影響結(jié)果的判斷。同時(shí)染液不易保存,每次染色時(shí)需要重新配制。我們經(jīng)實(shí)驗(yàn),采用50%乙醇作為溶解劑,減少了丙酮和異丙醇易揮發(fā)對人體的危害,染液不易產(chǎn)生沉淀;分化劑與油紅O染液中的溶劑性質(zhì)相似,這樣利于切片上多余染液的分化,故組織切片上沒有結(jié)晶產(chǎn)生。從而為病理診斷及鑒別診斷提供了可靠技術(shù)方法。組織常規(guī)用中性福爾馬林固定,但用甲醛—鈣液(40%甲醛10ml,蒸餾水90m1,氯化鈣1g)固定效果更好,這樣有利于保存磷脂。
封固顯示脂肪的切片時(shí),切片不宜太干,否則易產(chǎn)生氣泡。發(fā)現(xiàn)有氣泡,不能壓蓋玻片驅(qū)趕,因?yàn)檫@樣會使脂滴移位。若有氣泡可用溫水浸掉蓋玻片,而后再封固。
毓秀生物科技(上海)有限公司是一家專注于生物科技前沿技術(shù)研發(fā)和科研技術(shù)服務(wù)的公司,公司建有專業(yè)的分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、組織病理學(xué)實(shí)驗(yàn)室,為眾多生物醫(yī)藥企業(yè)、科研機(jī)構(gòu)、醫(yī)院及高校提供分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、病理形態(tài)學(xué)等方面科研服務(wù)。公司核心團(tuán)隊(duì)曾在國內(nèi)外許多優(yōu)秀學(xué)府從事過多年研發(fā)工作,秉承“為客戶創(chuàng)造價(jià)值,為員工實(shí)現(xiàn)夢想,為社會創(chuàng)造財(cái)富”的經(jīng)營理念,堅(jiān)持以技術(shù)創(chuàng)新為先導(dǎo),以服務(wù)質(zhì)量為根本,為中國生物醫(yī)藥和科學(xué)研究提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)。
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